袋进袋出过滤系统是生物安全实验室的重要排风设备。为了保护实验室外的空气不受污染,实验室内的排气过滤单元采用袋中袋出的方式,在更换过滤器之前,进出过滤箱的袋子需要进行灭菌。对袋进袋出过滤系统进行灭菌的比较有效的方法是采用VHP灭菌。
袋进袋出过滤系统VHP杀菌过程如下:
1. 使用软管将汽化过氧化氢灭菌器连接到消毒端口。有两个消毒口,分别在袋子的两端进出过滤系统。
2. 将用于效果验证的生物指示剂(嗜热脂肪杆菌芽孢,含菌量:10^6)和化学指示剂分别放在一级高效过滤器前4组、一级和二级过滤器中间2组、二级过滤器后3组、灭菌剂回路的软管中1组,每组包含1片化学指示剂和1片生物指示剂。
3. 经过三小时灭菌后,可发现灭菌回路软管中的化学指示剂已经完全变色。降解过氧化氢后,断开过滤器连接管路,打开过滤器检修门,取出高效过滤器(用袋进袋出的方式取出过滤器,人员不可直接接触到过滤器),取出所有指示剂。
4. 观察化学指示剂变色结果,所有化学指示剂均已完全变色。将实验组生物指示剂和阳性对照生物指示剂接种培养,制作阴性对照组并培养。7日后观察培养效果,所有实验组及阴性对照组培养基均无微生物生长,阳性对照组培养基有微生物生长,可证明用于验证的指示剂均通过测试,灭菌合格。
该方案可用于高等级生物安全实验室袋进袋出过滤单元的过滤器更换及维护工作。该测试方法打破了高等级生物安全实验室袋进袋出过滤系统使用甲醛或臭氧消毒灭菌的模式,既能保证操作人员的职业安全健康,又可保证过滤系统的灭菌效果,是生物安全实验室袋进袋出过滤系统灭菌的非常合适的方法。
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